تشخیص عفونت HIV با اندازه گیري پادتن هاي اختصاصی HIV در بیماران انجام می شود. زمان انجام آزمایش مهم است. پادتن های HIV با روش های معمول سرولوژیک (الیزا و وسترن بلات) تا سه هفته پس از عفونت قابل تشخیص نیستند. بخشی از آزمایش پادتن، دریافت مشاوره پیش و پس از آزمایش است. آزمایش تعیین بار ویروسی HIV، که اندازه گیری مستقیم HIV در پلاسماست، هرگز نباید به عنوان اولین روش تشخیصی فردی که مشکوک به عفونت مزمن است استفاده شود چرا که نتایج مثبت کاذب با تیتر پایین (کمتر از ٢٠٠٠ نسخه در میلی لیتر) در بیماری های حاد غیر از HIV دارد و نشانگر جایگزین اصلی برای عملکرد ایمونولوژیک است.